Sviluppo e validazione di un metodo HPLC-RID/CAD per la determinazione del profilo polisaccaridico di sciroppi a base di glucosio

La caratterizzazione della composizione polisaccaridica degli sciroppi di glucosio rappresenta una sfida analitica complessa, dovuta alla necessità di caratterizzare una miscela eterogenea di composti polimerici con un ampio range di pesi molecolari. Il presente lavoro di tesi descrive lo sviluppo e la validazione di un metodo HPLC accoppiato a rivelazione a indice di rifrazione (RID) per la separazione di oligomeri con grado di polimerizzazione (DP) compreso tra 1 e 30. La parte sperimentale ha previsto la valutazione comparativa di tre diverse colonne HILIC (cromatografia a interazione idrofila) con fasi stazionarie distinte. Una volta selezionata la fase stazionaria ottimale, il metodo è stato ottimizzato e sottoposto a validazione verificandone linearità, riproducibilità e limite di quantificazione relativamente ai diversi DP. I risultati ottenuti confermano che l'approccio HILIC-RID proposto costituisce una soluzione efficace e robusta per la caratterizzazione di sciroppi di glucosio di varia provenienza, anche applicabile a procedure di controllo di qualità.