Caratterizzazione di un composto che inibisce l’interazione tra l’oncoproteina E7 del papillomavirus umano e la proteina cellulare pRb

I papillomavirus umani (HPV) sono virus a DNA a doppio filamento appartenenti alla famiglia dei Papillomaviridae, con tropismo epiteliale. I genotipi ad alto rischio (HR-HPV) sono responsabili della quasi totalità dei carcinomi della cervice uterina, nonché di tumori dei distretti anogenitale e testa-collo. Le terapie attualmente utilizzate contro i tumori indotti da HPV si basano sull’impiego di farmaci antitumorali classici, con notevoli effetti collaterali, e non sono ancora stati approvati trattamenti specifici. I meccanismi oncogeni degli HR-HPV dipendono dalle attività delle oncoproteine virali E6 ed E7, che inducono, rispettivamente, la degradazione proteasoma-mediata di p53 e pRb. Quest’ultimo è un oncosoppressore che regola il ciclo cellulare. In questo lavoro di tesi abbiamo caratterizzato il meccanismo d’azione del composto CB-1, emerso da uno screening precedentemente condotto dal nostro gruppo di ricerca per identificare inibitori dell’oncoproteina E7. Dopo aver dimostrato la capacità del composto di ripristinare i livelli intracellulari di pRb, tramite saggi di citotossicità e di apoptosi abbiamo dimostrato l’attività selettiva di CB-1 nei confronti di cellule tumorali HPV-positive. Infine, mediante saggi ELISA e saggi biofisici per lo studio di interazioni molecolari abbiamo dimostrato che CB-1, legando l’oncoproteina E7, è in grado di interferire con la formazione del complesso E7-pRb.