Identificazione e validazione di nuovi target per il trattamento delle miopatie da deficit di collagene VI

Il collagene VI (COL6) è una proteina della matrice extracellulare, la quale svolge un ruolo fondamentale nel muscolo scheletrico. Mutazioni a livello dei geni che codificano per le catene del COL6 portano allo sviluppo di patologie muscolari congenite, caratterizzate da un esordio precoce e rapido, per le quali ancora non esistono trattamenti terapeutici in grado di migliorarne il fenotipo. Pertanto, con lo scopo di accelerare l’individuazione di farmaci che possano essere utilizzati per il trattamento di queste patologie, è stato eseguito un drug repurposing sul modello zebrafish knockout per il COL6. Tramite questo studio, da una libreria di composti già approvati dall’FDA e quindi già utilizzati nell’uomo, ne sono stati individuati alcuni che agiscono sulla via di segnalazione del cAMP. Per prima cosa abbiamo confermato l’azione di tali farmaci sul recupero funzionale alterato nello zebrafish col6a1 knockout, osservato attraverso il Danio Vision a 48 hpf, dimostrando un effetto benefico di tali composti. Successivamente, ci siamo focalizzati sulla validazione della via del cAMP, in quanto questa non era mai stata associata a tali patologie. Pertanto, abbiamo inizialmente validato in vivo l’efficacia di tali composti osservando l’attivazione della via già tre ore dopo l’esposizione al farmaco. Tale dato è stato poi validato anche a 24 hpf mediante l’utilizzo della linea reporter di CREB. Si è poi indagato l’effettiva alterazione della via nel modello zebrafish col6a1 knockout dimostrando come questa sia meno attiva nei col6a1 knockout rispetto ai wild type. In seguito, abbiamo condotto studi preliminari con lo scopo di individuare ulteriori target terapeutici, soffermandoci dapprima sul fatto che alcuni dei farmaci selezionati agiscano sul pathway di AKT/mTOR/S6 e dimostrando come questi siano effettivamente in grado di modularlo e, successivamente, abbiamo indagato la possibile azione di tali farmaci sulla biogenesi mitocondriale.