Analisi del profilo dei componenti della superficie dei micobatteri indotto dalla proteina integrale di membrana LysX2

Mycobacterium tuberculosis, agente eziologico della tuberculosi, condivide con altri batteri un meccanismo di resistenza agli stress che consiste nella modulazione della superficie ad opera di proteine della famiglia MprF-like, aminoacil-fosfatidilglicerolo sintasi, che catalizzano mediante il dominio catalitico intracitoplasmatico la formazione di esteri aminoacilati del fosfatidilglicerolo, che sono traslocati nel foglietto esterno della membrana. In M. tuberculosis questa funzione è svolta dalla lisinil-fosfatidilglicerolo sintasi LysX; è stata inoltre individuata una proteina che mostra un dominio catalitico ortologo alle altre MprF-like, Rv1619, denominata LysX2, il cui dominio catalitico putativo è esposto nel periplasma e la cui espressione in Mycobacterium smegmatis conferisce forte riduzione di carica negativa superficiale e resistenza a diversi tipi di stress. Per comprendere le modalità d’azione della proteina, le componenti lipidiche di superficie di M. smegmatis e M. tuberculosis esprimenti LysX2 cresciuti a diversi pH sono state analizzate tramite TLC, evidenziando una variazione del pool lipidico rispetto ai ceppi privi della proteina. Inoltre, la mancanza di LysX2 comporta un’accelerazione della crescita a pH acido di M. tuberculosis, evidenziando un suo ruolo nel regolare la crescita in queste condizioni ambientali. In parallelo, per confermare la peculiare topologia di LysX2, è stato costruito un sistema inducibile nei micobatteri basato su fusioni geniche con i reporter LacZ e PhoA.