Ruolo degli anticorpi anti-HLA nel rigetto acuto e cronico nel trapianto cardiaco

Background: Rejection represents one of the main complications in patients undergoing heart transplantation. The presence of anti-HLA antibodies, particularly the development of donor-specific anti-HLA antibodies (DSA), has been associated with an increased risk of humoral rejection and a worsening prognosis. Currently, antibody-mediated humoral rejection does not have a standardized treatment consensus due to the variability of clinical-pathological manifestations. Aim of the Study: This longitudinal study aims to investigate the relationship between the presence of donor-specific anti-HLA antibodies, evaluated during the follow-up of heart transplant patients, and histopathological characteristics. Method: We selected a cohort of heart transplant patients at the Gallucci center of the Hospital-University Company of Padua between 2016 and 2020 who underwent antibody follow-up in the first year after transplantation. Of these patients, 74% were male and 26% female, with an age range of 17 to 52 years. The study included 80 patients, who were divided into four groups based on the anti-HLA antibodies developed during follow-up: anti-HLA negative, anti-HLA positive for both DSA and non-DSA, positive only for non-DSA, and positive only for DSA. Additionally, we collected all endomyocardial biopsies for monitoring for each patient and evaluated the following histological characteristics: myocytolysis, myocyte necrosis, interstitial edema, ischemic damage, vasculitis, and intravascular inflammatory infiltrate. Immunohistochemical staining was performed to study complement activation (C4d) and the immunophenotypic characterization of macrophages (CD68). Results: The frequency of de novo antibody appearance is 56.5% (45/80), divided into nDSA+ and DSA+ with 38% (17/45) being nDSA+, 51% (23/45) being DSA+, and 11% (5/45) being DSA+. It emerged that histological criteria such as complement deposition, assessed by the grading of C4d positivity; endothelial damage and vasculitis; and the deposition of intravascular macrophage aggregates, are significantly more present in patients belonging to antibody groups with the presence of DSA. In fact, 80% of BEM with C4d grading of 2/3 belong to patients in antibody groups with DSA (44% DSA+ | nDSA+ and 36% with only DSA); 69.5% of BEM with CD68 > 10% belong to patients in antibody groups with DSA (56.5% DSA+ | nDSA+ and 13% with only DSA). Conclusions: The study demonstrates that organ damage (allograft), in the presence of donor-specific anti-HLA antibodies, manifests with various grades of complement deposition, showing variability in organ-specific damage and indicating that humoral rejection is a morphological and clinical "continuum.

Background. Il rigetto rappresenta una delle principali complicanze nei pazienti sottoposti a trapianto cardiaco. La presenza di anticorpi anti-HLA, in particolare lo sviluppo di anticorpi anti-HLA donatore-specifici (DSA), è stata associata a un aumentato rischio di rigetto umorale e a un peggioramento della prognosi. Allo stato attuale il rigetto umorale anticorpo-mediato non ha un consenso standardizzato di trattamento a causa della variabilità della manifestazione clinico-patologica. Scopo dello studio. Questo studio longitudinale ha lo scopo di indagare la relazione tra la presenza di anticorpi anti-HLA donatore specifico, valutati nel follow up di pazienti trapiantati di cuore e le caratteristiche istopatologiche. Metodo. Abbiamo selezionato una coorte di pazienti trapiantati di cuore presso il centro Gallucci dell’azienda ospedaliera-università di Padova tra il 2016 e il 2020 che hanno eseguito il follow up anticorpale nel primo anno dopo il trapianto, di questi il 74% maschi e il 26% femmine, in un range di età compreso tra i 17 e i 52 anni. Lo studio ha incluso 80 pazienti, che sono stati suddivisi in quattro gruppi in base agli anticorpi anti-HLA sviluppati durante il follow-up: anti-HLA negativi, anti-HLA positivi sia per DSA che per non-DSA, positivi solo per non-DSA, positivi solo per DSA. Inoltre abbiamo raccolto tutte le biopsie endomiocardiche di monitoraggio per ogni paziente e valutate le seguenti caratteristiche istologiche: miocitolisi, necrosi miocitaria, edema interstiziale, danno ischemico, vasculite, infiltrato infiammatorio intravascolare. Sono state eseguite le colorazioni immunoistochimiche per lo studio dell’attivazione del complemento (C4d) e la caratterizzazione immuofenotipica dei macrofagi (CD68). Risultati. La frequenza di comparsa di anticorpi de novo è 56,5% (45/80), suddivisi in nDSA+ e DSA+ 38% (17/45), nDSA+ 51% (23/45) e DSA+ 11% (5/45). È emerso che criteri istologici come la deposizione del complemento, grazie al grading di positività del C4d; il danno endoteliale e la vasculite e la deposizione di aggregati macrofagi intravascolari, siano significativamente più presenti nei pazienti appartenenti ai gruppi anticorpali con presenza di DSA: di fatto l’80% di BEM con grading C4d di 2/3, appartengono a pazienti dei gruppi anticorpali con DSA (44% DSA+|nDSA+ e 36% con soli DSA); il 69,5% delle BEM con CD68 > 10% appartengono a pazienti dei gruppi anticorpali con DSA (56,5% DSA+|nDSA+ e 13% con soli DSA). Conclusioni Lo studio dimostra che il danno d’organo (allograft), in presenza di anticorpi antiHLA donatore specifici si manifesta con vari grading di deposizione del complemento, con variabilità di danno specifici d’organo dimostrando che il rigetto uomorale è un “continuum” morfologico e clinico.