L’antimicrobico-resistenza (AMR) rappresenta una minaccia crescente per la salute pubblica e veterinaria in ottica One Health. Particolare preoccupazione desta la perdita di efficacia della colistina, antibiotico di ultima istanza, a causa della diffusione di geni mobilized colistin resistance (mcr), spesso veicolati da plasmidi e quindi facilmente trasferibili tra batteri ambientali, animali e umani. In questo contesto è cruciale disporre di strumenti diagnostici rapidi, economici e sensibili, idonei sia alla sorveglianza clinica sia al monitoraggio ambientale. Il presente studio ha mirato alla validazione di due saggi multiplex PCR per la rilevazione dei geni mcr1–5, e mcr9. La validazione della tecnica ha incluso valutazioni di sensibilità analitica, specificità e riproducibilità. I risultati dimostrano che entrambi i protocolli garantiscono elevata sensibilità e specificità, tempi di risposta brevi (compatibili con il workflow di laboratorio routinario) e scalabilità per lo screening di un ampio numero di campioni. Tali metodi consentono l’individuazione simultanea dei principali determinanti di resistenza alla colistina, supportando la sorveglianza e l’identificazione precoce di ceppi mcr-positivi in contesti clinici e ambientali. In conclusione, le multiplex PCR validate costituiscono strumenti pratici e affidabili per rafforzare le strategie di controllo dell’AMR legata alla colistina.

Validazione e implementazione di test multiplex PCR per la ricerca dei geni mcr (mobilized colistin resistance) implicati nella resistenza alla colistina.

BECCARELLI, ETHEL
2024/2025

Abstract

L’antimicrobico-resistenza (AMR) rappresenta una minaccia crescente per la salute pubblica e veterinaria in ottica One Health. Particolare preoccupazione desta la perdita di efficacia della colistina, antibiotico di ultima istanza, a causa della diffusione di geni mobilized colistin resistance (mcr), spesso veicolati da plasmidi e quindi facilmente trasferibili tra batteri ambientali, animali e umani. In questo contesto è cruciale disporre di strumenti diagnostici rapidi, economici e sensibili, idonei sia alla sorveglianza clinica sia al monitoraggio ambientale. Il presente studio ha mirato alla validazione di due saggi multiplex PCR per la rilevazione dei geni mcr1–5, e mcr9. La validazione della tecnica ha incluso valutazioni di sensibilità analitica, specificità e riproducibilità. I risultati dimostrano che entrambi i protocolli garantiscono elevata sensibilità e specificità, tempi di risposta brevi (compatibili con il workflow di laboratorio routinario) e scalabilità per lo screening di un ampio numero di campioni. Tali metodi consentono l’individuazione simultanea dei principali determinanti di resistenza alla colistina, supportando la sorveglianza e l’identificazione precoce di ceppi mcr-positivi in contesti clinici e ambientali. In conclusione, le multiplex PCR validate costituiscono strumenti pratici e affidabili per rafforzare le strategie di controllo dell’AMR legata alla colistina.
2024
Validation and implementation of multiplex PCR assays for the detection of mcr (mobilized colistin resistance) genes involved in colistin resistance.
PCR
mcr
AMR
Validation
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Utilizza questo identificativo per citare o creare un link a questo documento: https://hdl.handle.net/20.500.12608/101810