Valutazione del ruolo prognostico delle citochine infiammatorie nel TNBC: un'analisi traslazionale del trial A-BRAVE

Introduction: Triple-negative breast cancer (TNBC) is an aggressive and highly heterogeneous malignancy, yet it is characterized by distinct immunogenicity. In this scenario, circulating plasma cytokines emerge as promising, easily accessible dynamic biomarkers capable of reflecting the state of the tumor microenvironment and supporting patient prognostic stratification. Objective: to evaluate the prognostic significance of plasma levels from a broad panel of cytokines in patients with high-risk early-stage TNBC, utilizing biological samples prospectively collected within the phase III randomized multicenter A-BRAVE trial. Materials and methods: baseline plasma samples from 322 patients, corresponding to 69.1% of the total study population, were analyzed. Concentrations of 47 cytokines, chemokines, and growth factors were determined using Luminex xMAP multiplex technology. Associations with clinicopathological features were investigated using non-parametric statistical tests (Mann-Whitney, Kruskal-Wallis, and Spearman correlation). Prognostic value regarding outcomes [distant disease-free survival (DDFS) and overall survival (OS)] was evaluated using Cox regression models, with correction for multiple comparisons. Results: the cytokine profile showed significant correlations with several patient characteristics. Eotaxin, IP-10, and MIG were positively correlated with age. IL-6 and VEGF-A showed significantly higher levels in overweight or obese patients. Tumor stage emerged as the most impactful variable, correlating with an increase in eight analytes (IL-9, IL-13, IL-5, IL-10, MIG, Fractalkine, IL-22, TNFα) in more advanced settings. In the univariate Cox analysis, increasing levels of IL-3 (HR = 1.42, 95% CI 1.01-2.01, p = 0.043), IL-22 (HR = 1.15, 95% CI 1.01-1.31, p = 0.032), MIP-1β (HR = 1.13, 95% CI 1.01-1.25, p = 0.028), and FLT-3L (HR = 1.18, 95% CI 1.05-1.32, p = 0.006) were associated with reduced DDFS. Moreover, increases in FLT-3L predicted inferior OS (HR = 1.17, 95% CI 1.02-1.35, p = 0.021), while IL-12p40 showed a protective effect, being associated with a reduced risk of death (HR = 0.82, 95% CI 0.69-0.97, p = 0.023). In the multivariate Cox analysis FLT-3L confirmed the effect observed in the univariate analysis for DDFS (HR = 1.15, 95% CI 1.004-1.33, p = 0.044), but not for OS (p = 0.062); IL-22 remained significant for DDFS (HR = 1.19, 95% CI 1.01-1.39, p = 0.036) and acquired a negative prognostic significance for OS (HR = 1.22, 95% CI 1.01-1.47, p = 0.04); MIP-1β was borderline significant for DDFS (p = 0.05) but acquired a negative prognostic significance for OS (HR = 1.16, 95% CI 1.01-1.34, p = 0.038); IL-3 became non-significant for DDFS after correction (p = 0.064); IL-12p40 maintained the protective effect on survival observed in the univariate analysis (HR = 0.81, 95% CI 0.67-0.98, p = 0.032).. Conclusions: we identified that certain plasma cytokines are potential prognostic biomarkers in high-risk early-stage TNBC. These findings are exploratory and will require validation in independent cohorts.

Introduzione: il carcinoma mammario triplo negativo (TNBC) è una neoplasia aggressiva ed estremamente eterogenea, ma contraddistinta da una spiccata immunogenicità. In questo scenario, le citochine plasmatiche circolanti si delineano come promettenti biomarcatori dinamici e facilmente accessibili, in grado di riflettere lo stato del microambiente tumorale e di supportare la stratificazione prognostica dei pazienti. Obiettivo: valutare il significato prognostico dei livelli plasmatici di un ampio pannello di citochine in pazienti affette da TNBC in stadio precoce ad alto rischio, utilizzando i campioni biologici raccolti prospetticamente nell'ambito del trial multicentrico randomizzato di fase III A-BRAVE. Materiali e metodi: sono stati analizzati i campioni plasmatici basali di 322 pazienti, corrispondenti al 69,1% della popolazione complessiva dello studio. Le concentrazioni di 47 citochine, chemochine e fattori di crescita sono state determinate mediante tecnologia multiplex Luminex xMAP. Le associazioni con le caratteristiche clinico-patologiche sono state investigate mediante test statistici non parametrici (Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e correlazione di Spearman), mentre il valore prognostico rispetto agli outcome [sopravvivenza libera da recidiva a distanza (DDFS) e alla sopravvivenza globale (OS)] è stato valutato mediante modelli di regressione di Cox, con correzione per confronti multipli. Risultati: il profilo citochinico ha mostrato correlazioni significative con diverse caratteristiche delle pazienti: Eotassina, IP-10 e MIG sono risultate positivamente correlate con l'età; IL-6 e VEGF-A hanno mostrato livelli significativamente più elevati nelle pazienti sovrappeso o obese; lo stadio tumorale è emerso come la variabile maggiormente impattante, correlando con l'incremento di otto analiti (IL-9, IL-13, IL-5, IL-10, MIG, Fractalkine, IL-22, TNFα) nei contesti più avanzati. All'analisi di Cox univariabile, livelli crescenti di IL-3 (HR = 1.42, 95%CI 1.01-2.01, p = 0.043), IL-22 (HR = 1.15, 95%CI 1.01-1.31, p = 0.032), MIP-1β (HR = 1.13, 95%CI 1.01-1.25, p = 0.028) e FTL-3L (HR = 1.18, 95%CI 1.05-1.32, p = 0.006) sono stati associati ad una ridotta DDFS. Inoltre, incrementi di FTL-3L hanno predetto una OS inferiore (HR = 1.17, 95%CI 1.02-1.35, p = 0.021), mentre l'IL-12p40 ha mostrato un effetto protettivo associandosi a una riduzione del rischio di morte (HR = 0.82, 95%CI 0.69-0.97, p = 0.023). All’analisi di Cox multivariabile FTL-3L ha confermato l’effetto presente nell’analisi univariabile per la DDFS (HR = 1.15 , 95%CI 1.004-1.33, p = 0.044), ma non per la OS (p = 0.062); IL-22 è rimasta significativa in termini di DDFS (HR = 1.19, 95%CI 1.01-1.39, p = 0.036) e ha acquisito significato prognostico negativo in termini di OS (HR = 1.22, 95%CI 1.01-1.47, p = 0.04); MIP-1β è risultato al limite della significatività in termini di DDFS (p = 0.05) ma ha acquisito un significato prognostico negativo in OS (HR = 1.16, 95%CI 1.01-1.34, p = 0.038); IL-3 è risultata non significativa per DDFS dopo correzione (p = 0.064); IL-12p40 ha mantenuto l’effetto protettivo sulla sopravvivenza presente all’analisi univariabile (HR = 0.81, 95%CI 0.67-0.98, p = 0.032). Conclusioni: abbiamo identificato come alcune citochine plasmatiche siano potenziali biomarcatori prognostici nel TNBC precoce ad alto rischio. Questi risultati hanno carattere esplorativo e richiederanno una validazione in coorti indipendenti.