Studio di peptidi antimicrobici mediante tecniche avanzate di microscopia a fluorescenza: approcci STED, FLIM e analisi di correlazione quantitativa

La resistenza agli antibiotici è una problematica attuale e diffusa che richiede la ricerca di soluzioni innovative. Il progetto a cui ho preso parte, svolto presso la University of California, Irvine (UCI), individua una risposta nei peptidi antimicrobici (AMP) che, grazie alla loro interazione aspecifica con le membrane, riducono l'insorgenza di resistenze. Questo lavoro di tesi si concentra sui metodi per l'elaborazione e l'analisi quantitativa di dati derivanti da bioimmagini, con lo scopo di studiare come i peptidi legati a fluorofori interagiscono con le membrane di batteri e cellule umane. Per farlo, sono state utilizzate la microscopia confocale e a super-risoluzione STED, necessarie per valutarne la localizzazione spaziale, e la microscopia FLIM con il metodo dei fasori per misurare il tempo di vita della fluorescenza. In particolare, l'elaborato vuole approfondire le procedure di analisi ed estrazione dei parametri quantitativi tramite tecniche di correlazione spettroscopica e d'immagine (FCS e ICS), illustrando come tali strumenti vengano applicati ai dati sperimentali e discutendone i limiti attuali e le prospettive future.