Ripristino del genotipo e della funzione visiva in modelli murini di LHON mediante base editing mitocondriale in vivo.

Le malattie genetiche sono patologie che insorgono a partire da alterazioni nella sequenza del DNA andando a compromettere il funzionamento delle cellule. Queste mutazioni possono essere ereditate oppure insorgere spontaneamente in un individuo, inoltre possono colpire sia il DNA nucleare che quello mitocondriale. Negli ultimi anni stanno sorgendo delle nuove strategie per la cura di queste condizioni attraverso la terapia genica, che prevede di modificare il DNA del paziente per correggere la sequenza mutata e ripristinare il funzionamento della cellula. In questo elaborato verrà trattato un approccio volto a ripristinare il genotipo e fenotipo wild-type in modelli di LHON (Neuropatia Ottica Ereditaria di Leber). Per prima cosa verranno sfruttati dei base editors di citosine basati su DddA ad alta fedeltà (Hifi-DdCBE) per generare modelli murini portatori della mutazione patogena m.G11778A sul gene MT-DN4, una delle principali responsabili dello sviluppo della malattia in uomo. Gli animali generati presenteranno i fenotipi caratteristici della malattia, come la perdita di cellule gangliari retiniche e la compromissione visiva. Successivamente verrà ripristinato il fenotipo wild-type degli animali con un approccio che prevede la somministrazione intravitreale di virus adeno-associati (AAV) codificanti per deaminasi legate a TALE (Transcription Activator-Like Effectors), generando complessi TALED (TALED-Linked Deamminase).