Analisi dell’espressione del miR-210 in modelli di differenziamento retinico e tessuti corneali umani

MicroRNAs (miRNAs) are a class of noncoding RNAs that regulate gene expression. Among them, miR-210 is one of the most evolutionarily conserved and it’s involved in numerous physiological and pathological processes, largely in response to hypoxic conditions. It has recently been observed that miR-210 knockout can lead to retinal degeneration in both Drosophila melanogaster and Mus musculus. To investigate and understand the importance of miR-210 in ocular tissues, this thesis evaluated its expression profiles in cellular models of retinal differentiation and in human corneal tissues. After extracting total RNA and assessing its purity and integrity, we then performed quantitative PCR (qRT-PCR). The results of this analysis highlighted the expression of miR-210 in all analyzed samples, with different expression levels both during the developmental stages of the retinal pigment epithelium and in the corneas of different patients. The observed variability in expression levels suggests a possible involvement of this gene in the development and maintenance of ocular homeostasis in humans as well. However, this role will need to be studied in deeper through further studies.

I microRNA (miRNA) sono una classe di RNA non codificanti con funzione di regolazione dell’espressione genica. Tra di essi, il miR-210 è uno dei più conservati evolutivamente ed è coinvolto in numerosi processi sia fisiologici che patologici, in larga parte in risposta a condizioni di ipossia. Recentemente è stato osservato come l’abolizione dell’espressione (knock-out) del miR-210 possa portare ad una degenerazione retinica, sia in esemplari di Drosophila melanogaster che di Mus musculus. Al fine di investigare e comprendere l’importanza del miR-210 in tessuti oculari, in questa tesi ne sono stati valutati i profili di espressione in modelli cellulari di differenziamento retinico e in tessuti corneali di origine umana. A seguito dell’estrazione dell’RNA totale e della valutazione della sua purezza e integrità, si è quindi proceduto effettuando una PCR quantitativa (qRT-PCR). I risultati di questa analisi hanno evidenziato l’espressione del miR-210 in tutti i campioni analizzati, con livelli di espressione diversi sia durante le fasi di sviluppo dell’epitelio pigmentato retinico che nelle cornee di diversi pazienti. La variabilità osservata nei livelli di espressione suggerisce un possibile coinvolgimento di questo gene nello sviluppo e nel mantenimento dell’omeostasi oculare anche nell’uomo. Tale ruolo dovrà essere tuttavia approfondito mediante ulteriori studi.