Validazione di tecniche per la caratterizzazione della giunzione miotendinea in un modello murino di miopatia da deficit di Collagene VI

Il collagene VI (ColVI) è una componente della matrice extracellulare che possiede sia funzioni meccaniche che citoprotettive. Mutazioni nei geni per le catene del ColVI causano patologie umane del muscolo scheletrico, come la miopatia di Bethlem e distrofia muscolare congenita di Ullrich, caratterizzate anche da alterazioni tendinee. In questo contesto, tuttavia, lo studio della giunzione miotendinea (MTJ) non è stato ancora approfondito. Lo scopo della tesi è stato quello di validare le tecniche necessarie ad evidenziare alterazioni della MTJ in un modello murino privo di ColVI. Si sono svolte indagini su sezioni di muscolo tibiale, tra cui l’immunofluorescenza per la validazione di marker noti di MTJ, e la colorazione con Picrosirius Red. La tecnica del western blotting è servita a quantificare proteine arricchite alla MTJ in lisati proteici di diaframma. Tramite immunofluorescenza è stato validato il collagene XXII come marcatore specifico per MTJ, evidenziando alterazioni nella sua distribuzione nei topi ColVI knock-out. L’analisi in western blotting ha permesso di quantificare marcatori specifici della giunzione. In conclusione, i dati preliminari raccolti in questo studio hanno permesso di validare le tecniche per studiare la MTJ, gettando le basi per chiarire il ruolo del ColVI in questo sito cruciale per la funzionalità muscolare.