In base a quanto descritto in letteratura, la globulina legante gli ormoni sessuali (SHBG) è la principale proteina coinvolta nel trasporto degli ormoni sessuali nel sangue, per la maggior parte dei vertebrati (Avvakumov et al., 2010). In questo senso l’attività di SHBG è utile per regolare l’accesso degli ormoni sessuali ai loro tessuti target (Avvakumov et al., 2010). Inoltre, studi computazionali e di ricerca di base hanno portato all’identificazione di altri possibili ligandi per SHBG, tra cui farmaci e altri ligandi endogeni non steroidei (Guadarrama- García et al., 2020). La parte sperimentale di questo elaborato è finalizzata all’espressione e alla purificazione del dominio cristallizzabile della globulina. Per prima cosa una forma tronca della proteina SHBG è stata fatta esprimere in coltura cellulare in sospensione di cellule della linea HEK293. Grazie a tecniche di cromatografia e SDS-PAGE, la proteina è stata purificata, analizzata e resa così disponibile per eseguire ulteriori analisi di interesse. L’attività si inserisce in senso più ampio all’interno di un progetto volto alla valutazione dell’eventuale interazione di SHBG con degli inquinanti ambientali. Studi precedenti hanno infatti portato a sviluppare l’ipotesi per cui i composti perfluoroalchilici in particolare possano agire come perturbatori endocrini determinando alterazioni nei meccanismi riguardanti gli ormoni sessuali (Di Nisio et al., 2019).
Espressione e purificazione del dominio cristallizzabile di una globulina legante ormoni sessuali
FERRARI, ANNACHIARA
2021/2022
Abstract
In base a quanto descritto in letteratura, la globulina legante gli ormoni sessuali (SHBG) è la principale proteina coinvolta nel trasporto degli ormoni sessuali nel sangue, per la maggior parte dei vertebrati (Avvakumov et al., 2010). In questo senso l’attività di SHBG è utile per regolare l’accesso degli ormoni sessuali ai loro tessuti target (Avvakumov et al., 2010). Inoltre, studi computazionali e di ricerca di base hanno portato all’identificazione di altri possibili ligandi per SHBG, tra cui farmaci e altri ligandi endogeni non steroidei (Guadarrama- García et al., 2020). La parte sperimentale di questo elaborato è finalizzata all’espressione e alla purificazione del dominio cristallizzabile della globulina. Per prima cosa una forma tronca della proteina SHBG è stata fatta esprimere in coltura cellulare in sospensione di cellule della linea HEK293. Grazie a tecniche di cromatografia e SDS-PAGE, la proteina è stata purificata, analizzata e resa così disponibile per eseguire ulteriori analisi di interesse. L’attività si inserisce in senso più ampio all’interno di un progetto volto alla valutazione dell’eventuale interazione di SHBG con degli inquinanti ambientali. Studi precedenti hanno infatti portato a sviluppare l’ipotesi per cui i composti perfluoroalchilici in particolare possano agire come perturbatori endocrini determinando alterazioni nei meccanismi riguardanti gli ormoni sessuali (Di Nisio et al., 2019).File | Dimensione | Formato | |
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https://hdl.handle.net/20.500.12608/34806