PURIFICAZIONE DI Nqo15 PER FUTURI STUDI FUNZIONALI: UN POSSIBILE AVANZAMENTO NELLA CONOSCENZA DEI MECCANISMI MOLECOLARI DELL’ATASSIA DI FRIEDREICH

L’atassia di Friedreich (FRDA) è una patologia neurodegenerativa che colpisce primariamente il tessuto nervoso e cardiaco: provoca una grave atassia con perdita progressiva delle funzioni muscolari associata a cardiomiopatia ipertrofica. È causata da mutazioni nel gene FXN che codifica per fratassina, una piccola proteina localizzata nella matrice mitocondriale in associazione con la membrana mitocondriale interna, la cui funzione non è ancora del tutto nota. Nqo15 è una subunità del complesso I della catena respiratoria isolata dal batterio Thermus thermophilus la cui probabile funzione è quella di stabilizzare il complesso. Studi strutturali hanno evidenziato un’alta similarità tra Nqo15 e la fratassina umana, di conseguenza si punta ad indagarne anche possibili relazioni funzionali in vista di un futuro avanzamento nella conoscenza dei meccanismi molecolari alla base di FRDA, non ancora del tutto chiariti. Nel presente elaborato è stato descritto un protocollo di purificazione di Nqo15: è stata indotta in cellule di Escherichia coli l’espressione di Nqo15 in forma ricombinante e successivamente la proteina è stata purificata tramite cromatografia a scambio anionico. Lo scopo del lavoro è quello di rendere Nqo15 disponibile per futuri studi funzionali che verranno poi confrontati con gli studi funzionali su fratassina già condotti in laboratorio.