Sviluppo di un metodo molecolare per la ricerca dell'RNA subgenomico di SARS-CoV-2

Il test per la ricerca di SARS-CoV-2, considerato il gold standard, è un saggio molecolare basato sulla Real time PCR che rileva la presenza di RNA genomico del virus, ma non è in grado di distinguere tra i soggetti infettivi e lo shedding di frammenti virali non infettivi. D’altro canto, la coltura virale, che permette di valutare l’effettiva capacità di replicazione di un virus, richiede laboratori con un livello di biosicurezza 3, personale altamente specializzato e tempi tecnici di esecuzione lunghi, risultando perciò incompatibile con le necessità assistenziali. Si rivela quindi di fondamentale importanza sviluppare dei test diagnostici semplici e di rapida esecuzione che possano funzionare come surrogati della coltura cellulare. Numerosi lavori presenti in letteratura evidenziano come marker di infettività, nel corso dell’infezione da SARS-CoV-2, la ricerca di RNA subgenomico (sgRNA). A tal proposito in questa tesi si tratterà dello sviluppo di un metodo molecolare per la ricerca di sgRNA basato sul gene N al fine di implementare il test molecolare, già in uso, basato sulla ricerca di sgRNA E.