Infiammazione e proliferazione cellulare durante la rigenerazione della pinna caudale in zebrafish

Il sistema immunitario nell'uomo è il diretto responsabile della risposta immunitaria e infiammatoria. Questa risposta infiammatoria è stimolata in caso di eventi dannosi, come la presenza di patogeni invasori, ferite o cellule danneggiate. Il sistema immunitario innato, in particolare, che comprende l'attività di macrofagi e neutrofili, svolge un ruolo critico e fondamentale in tutte le risposte infiammatorie. Questa parte del sistema immunitario è ben conservata tra uomo e zebrafish (Danio rerio o pesce zebra) ed in tale animale è facilmente analizzabile in svariati processi, inclusa la riparazione dei tessuti. A differenza di altri organismi modello, la pinna caudale del pesce zebra presenta elevata capacità rigenerativa; la sua parziale amputazione non è associata a comportamenti di sofferenza o alla morte dell'animale. Questo elaborato di tesi si basa sull'utilizzo del modello zebrafish per lo studio dell'efficienza di un anticorpo specifico per L-Plastin, una proteina legante l'actina che svolge un ruolo nell'attivazione dei leucociti, così da poter osservare nel dettaglio il processo infiammatorio. Il processo infiammatorio è stato stimolato dall' amputazione parziale della pinna caudale. In parallelo, è stato osservato anche il processo rigenerativo, sempre a livello del sito di taglio. Ciò è stato possibile attraverso l'utilizzo di un anticorpo specifico per il Fosfo-istone H3 (PHH3), un tipico marcatore di mitosi e proliferazione cellulare. In questo studio è stato verificata l'efficacia in zebrafish dell'anticorpo contro L-plastin in un protocollo di immunofluorescenza, identificando anche la migliore concentrazione possibile utilizzabile. Questo risultato è molto importante per poter osservare in futuro processi infiammatori non collegati solo a traumi o ferite, ma anche a malattie genetiche o alterazioni fisiologiche, rendendo possibile individuare la presenza di cellule infiammatorie anche in specifici distretti anatomici.