Analisi dei livelli di espressione di proteina SERCA1 mutata in fibre muscolari scheletriche di bovini affetti da Pseudomiotonia trattate con i correttori del CFTR

La miopatia di Brody è una malattia congenita umana rara caratterizzata da mutazioni missenso a carico del gene codificante per la Ca-ATPasi muscolare scheletrica SERCA1. Precedenti studi hanno mostrato come nella specie bovina vi sia una malattia, denominata Pseudomiotonia (PMT), caratterizzata dal medesimo quadro sintomatologico e causata anch’essa da mutazioni del gene SERCA1. Lo studio della PMT ha permesso di chiarire il meccanismo patogenetico: il prodotto genico consiste spesso in una proteina difettosa nel “folding”. Ciò causa un aumento della degradazione della SERCA1 mutante che risulterà così espressa a livelli inferiori nel reticolo sarcoplasmatico. La PMT bovina è perciò utilizzata come modello animale per lo studio della miopatia di Brody. Per la cura di questa malattia, sono stati proposti i correttori del CFTR, che mirano a correggere il ripiegamento difettoso delle proteine mutate. Nella tesi qui proposta viene descritto uno studio ex-vivo finalizzato a verificare l’efficacia di questi farmaci nel trattamento di fibre muscolari scheletriche derivanti da bovini affetti da PMT. L’obbiettivo è stato quindi quello di verificare se in seguito alla somministrazione del farmaco venissero ripristinati i normali livelli di espressione della proteina SERCA1. A tale scopo sono state utilizzate le tecniche di gel elettroforesi e Western blotting.