Valutazione dell'infiltrato linfocitario in pazienti con carcinoma mammario HER2 positivo sottoposte a terapia neoadiuvante

Background: TILs’ morphological evaluation in breast cancer is achieving increasing importance as a prognostic and predictor marker of response to treatment, especially in residual disease (RD) after neoadjuvant chemotherapy (NACT) in patients who not obtain the complete eradication of residual disease (= pathologic-complete response, pCR). However, TILs’ impact is heterogeneous between different breast cancers and their role isn’t clear in HER2+ subtype. Purpose: We aim to evaluate the prognostic significance of tumor-infiltrating lymphocyte on residual disease (RD-TIL) in HER2+ breast cancer (BC) patients who failed to achieve pathologic-complete response (pCR) after neoadjuvant treatment, based on chemotherapy and targeted therapy anti-HER2. Also, we elaborated a composite score (RCB + TILs) that combining the prognostic information provided by residual cancer burden (RCB) and RD-TILs. Methods: We retrospectively included a multicenter cohort of patients with HER2+ breast cancer treated with neoadjuvant therapy. We recovered for each patient the hematoxylin/eosin stained slides of the histological material to the baseline biopsy, and, for patients who did not achieve pCR, of the histological material to the residual disease. RCB was evaluated through a tool online. Stromal TILs were evaluated according to recommendations of Working International Group on Immunological Biomarkers. Statistical analyses were produced through software IBM SPSS Statistics v24. Endpoint overall survival (OS) was used as an outcome measure and Kaplan-Meier analysis was used to estimate survival. Harrell’s index (C-index) was applied to define RD-TILs cut-off that better was associated with survival and to realize comparisons of prognostic performance of markers. Results: we included 295 patients, 195 of them showed RD after NACT. We observed a statistically positive relationship between basal TILs and pCR rates after NACT (pCR in high TILs [ 10%] vs low TILs [ 10%]: 64% vs 33%, p0,001). In patients who not achieve pCR, we observed a significant relationship between RCB and OS (HR 1,97; 95% CI 1,415-2,744; p0,001) and RD-TILs and OS (HR 2.32; 95% CI 1.07-5.03; p=0,028). In multivariate analysis, both RCB and RD-TILs have maintained a independent relationship with outcome (RCB: HR 1,90; 95% CI 1,35-2,67; p0,001; RD-TIL: HR 2,30; 95% CI 1,06-5,01; p=0,036). Composite score RCB + TILs were significantly associated with OS, both as continuous variable (HR 2,72; 95% CI 1,72-4,31; p0,001), both dichotomized variable (cut-off 1,72). The C-index for OS of the RCB+TIL score was numerically higher than that of RCB (0,73 vs 0,68 p=0,08) and significantly higher than that of RD-TILs (0,73 vs 0,58 p=0,07).

Background: La valutazione morfologica dei linfociti infiltranti il tumore (TILs) nel carcinoma mammario sta acquisendo sempre più rilievo come marcatore prognostico e predittivo di risposta al trattamento, in particolare nel contesto della malattia residua (RD) post chemioterapia neoadiuvante (NACT) in pazienti che non ottengono l’eradicazione completa della malattia residua (=risposta patologica completa, pCR). Tuttavia, l’impatto dei TILs è eterogeneo tra i diversi sottotipi di carcinoma mammario ed il ruolo non è ben chiaro nel sottotipo HER2+. Scopo dello studio: Lo scopo principale del presente studio è rappresentato dalla valutazione del ruolo prognostico dei TILs, analizzati sul residuo tumorale (RD-TILs) in pazienti affette da carcinoma mammario HER2+ sottoposte a trattamento neoadiuvante, a base di chemioterapia e targeted therapy anti-HER2. È stato inoltre elaborato uno score composito RCB + TILs che integra le informazioni prognostiche fornite dal “residual cancer burden” (RCB) e dall’infiltrato linfocitario RD-TILs. Materiali e metodi: È stata inclusa retrospettivamente una coorte multicentrica di pazienti con carcinoma mammario HER2+ sottoposte a trattamento neoadiuvante. Per ogni paziente sono state recuperate le sezioni colorate in ematossilina/eosina del materiale istologico relativo alla biopsia basale, e, per coloro che non hanno raggiunto la pCR, del materiale istologico relativo al residuo di malattia. Per ogni paziente è stato calcolato il RCB tramite tool online. I TILs stromali sono stati valutati adottando le raccomandazioni del Working Group Internazionale sui Biomarcatori Immunologici. Le analisi statistiche sono state condotte con software IBM SPSS Statistics v24. Per le analisi di sopravvivenza è stato adottato l’endpoint overall survival (OS) e applicato il metodo di Kaplan-Meier per stimare le curve di sopravvivenza. L’indice di Harrell (C-index) è stato applicato per determinare il cut-off dei RD-TILs che meglio correla con la prognosi e per eseguire confronti di performance prognostica dei diversi biomarcatori. Risultati: Abbiamo incluso 295 pazienti, di cui 195 presentavano RD dopo NACT. Abbiamo osservato una relazione positiva statisticamente significativa tra i livelli di TILs basali e la probabilità di raggiungimento della pCR dopo NACT (tassi di pCR in high TILs [ 10%] vs low TILs [ 10%]: 64% vs 33%, p0,001). Nel sottogruppo di pazienti che non ha raggiunto la pCR, abbiamo osservato una relazione significativa tra RCB e OS (HR 1,97; 95% CI 1,415-2,744; p0,001) e RD-TILs e OS (HR 2.32; 95% CI 1.07-5.03; p=0,028). In analisi multivariata, sia RCB sia RD-TILs hanno conservato una relazione significativa indipendente con l’outcome (RCB: HR 1,90; 95% CI 1,35-2,67; p0,001; RD-TIL: HR 2,30; 95% CI 1,06-5,01; p=0,036). Lo score composito RCB + TILs è risultato essere significativamente associato all’OS sia come variabile continua (HR 2,72; 95% CI 1,72-4,31; p0,001), sia dicotomizzato, adottando come cut-off 1,72. La performance prognostica dello score RCB + RD-TILs è risultata essere significativamente superiore a quella del RCB (0,73 vs 0,68 p=0,08) e a quella dei RD-TILs (0,73 vs 0,58 p=0,07). Conclusioni: Abbiamo riportato un impatto prognostico negativo dei RD-TILs in pazienti con carcinoma mammario HER2+ che hanno fallito il raggiungimento della pCR dopo NACT a base di chemioterapia + terapia targeted anti-HER2. Tale osservazione potrebbe sottendere uno squilibrio del microambiente immunitario della RD verso caratteristiche immunosoppressive. Abbiamo inoltre generato un nuovo score prognostico composito RCB + TILs, che si è rivelato essere più informativo rispetto alla valutazione isolata di RCB e RD-TILs nel predire l'OS. Questo modello composito potrebbe agevolare l’identificazione di pazienti ad alto rischio di recidiva che potrebbero beneficiare di trattamenti aggiuntivi nel setting post-neoadiuvante.