Inflammatory bowel disease (IBD) is a rapidly increasing medical condition last decades, and are characterized by impairment of intestinal physiological function, with resulting in worsening of the quality of life of affected patients.The etiology of IBD is multifactorial, for this reason the possibilities of therapeutic intervention are limited and often ineffective. The use of complementary medicine represents an interesting approach as an adjunct in symptomatological management of IBD, limiting the side effects deriving from pharmacological therapies conventional. In this thesis project the efficacy of a mix of probiotics in the regulation was tested of intestinal function parameters on an in vitro model of human colorectal adenocarcinoma. In in particular, the effect of the product on transepithelial electrical resistance (TEER) was evaluated physiological and inflammatory conditions, by treatment with bacterial Lipopolysaccharide (LPS), o the TNF-α/IFN-γ association. Paracellular permeability measurements were also performed for quantify the direct damage to the cell monolayer by inflammatory stimuli, and any protective effect provided by probiotics. The results obtained demonstrated a positive activity of the formulation in the restoration of a physiological intestinal barrier activity.

Le malattie infiammatorie intestinali (IBD) rappresentano una condizione patologica in netto aumento negli ultimi decenni, e sono caratterizzate dalla compromissione della funzionalità fisiologica intestinale, con conseguente peggioramento della qualità di vita dei pazienti che ne sono affetti. L’eziologia delle IBD è multifattoriale, per questo motivo le possibilità di intervento terapeutico sono limitate e spesso inefficaci. L'uso della medicina complementare rappresenta un approccio interessante come coadiuvante nella gestione sintomatologica delle IBD, limitando gli effetti collaterali derivanti dalle terapie farmacologiche convenzionali. In questo progetto di tesi è stata testata l’efficacia di una mix di probiotici nella regolazione di parametri di funzionalità intestinale su un modello in vitro di adenocarcinoma del colon-retto umano. In particolare, è stato valutato l’effetto del prodotto sulla resistenza elettrica transepiteliale (TEER), in condizioni fisiologiche e infiammatorie, mediante il trattamento con Lipopolisaccaride batterico (LPS), o l’associazione TNF-α/IFN-γ. Sono state inoltre effettuate misure di permeabilità paracellulare per quantificare il danno diretto al monostrato cellulare da parte degli stimoli infiammatori, e l’eventuale effetto protettivo fornito dai probiotici. I risultati ottenuti hanno dimostrato un’attività positiva della formulazione nel ripristino di una fisiologica attività di barriera intestinale.

La resistenza elettrica transepiteliale come parametro d'integrità di barriera intestinale in vitro: effetto di una combinzione di sostanze naturali e probiotici

SARTORI, ILARIA
2022/2023

Abstract

Inflammatory bowel disease (IBD) is a rapidly increasing medical condition last decades, and are characterized by impairment of intestinal physiological function, with resulting in worsening of the quality of life of affected patients.The etiology of IBD is multifactorial, for this reason the possibilities of therapeutic intervention are limited and often ineffective. The use of complementary medicine represents an interesting approach as an adjunct in symptomatological management of IBD, limiting the side effects deriving from pharmacological therapies conventional. In this thesis project the efficacy of a mix of probiotics in the regulation was tested of intestinal function parameters on an in vitro model of human colorectal adenocarcinoma. In in particular, the effect of the product on transepithelial electrical resistance (TEER) was evaluated physiological and inflammatory conditions, by treatment with bacterial Lipopolysaccharide (LPS), o the TNF-α/IFN-γ association. Paracellular permeability measurements were also performed for quantify the direct damage to the cell monolayer by inflammatory stimuli, and any protective effect provided by probiotics. The results obtained demonstrated a positive activity of the formulation in the restoration of a physiological intestinal barrier activity.
2022
The transepithelial electrical resistance as a parameter of intestinal barrier integrity in vitro: effect of a combination of natural substances and probiotics
Le malattie infiammatorie intestinali (IBD) rappresentano una condizione patologica in netto aumento negli ultimi decenni, e sono caratterizzate dalla compromissione della funzionalità fisiologica intestinale, con conseguente peggioramento della qualità di vita dei pazienti che ne sono affetti. L’eziologia delle IBD è multifattoriale, per questo motivo le possibilità di intervento terapeutico sono limitate e spesso inefficaci. L'uso della medicina complementare rappresenta un approccio interessante come coadiuvante nella gestione sintomatologica delle IBD, limitando gli effetti collaterali derivanti dalle terapie farmacologiche convenzionali. In questo progetto di tesi è stata testata l’efficacia di una mix di probiotici nella regolazione di parametri di funzionalità intestinale su un modello in vitro di adenocarcinoma del colon-retto umano. In particolare, è stato valutato l’effetto del prodotto sulla resistenza elettrica transepiteliale (TEER), in condizioni fisiologiche e infiammatorie, mediante il trattamento con Lipopolisaccaride batterico (LPS), o l’associazione TNF-α/IFN-γ. Sono state inoltre effettuate misure di permeabilità paracellulare per quantificare il danno diretto al monostrato cellulare da parte degli stimoli infiammatori, e l’eventuale effetto protettivo fornito dai probiotici. I risultati ottenuti hanno dimostrato un’attività positiva della formulazione nel ripristino di una fisiologica attività di barriera intestinale.
EPITELIO INTESTNALE
IBD
COLTURE CELLULARI
TEER
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