Messa a punto di un sistema innovativo basato sulla chemiluminescenza per la quantificazione dei livelli di espressione dei microRNA

I microRNA (miRNA) sono corti RNA non codificanti che regolano l’espressione genica a livello post-trascrizionale, agendo da repressori traduzionali o degradando gli RNA messaggeri (mRNA) bersaglio. Lo scopo di questo progetto è stato quello di testare un sistema innovativo e di recente sviluppo, basato sulla chemiluminescenza, per la quantificazione dei livelli di espressione dei miRNA confrontando, poi, i risultati con quelli ottenuti tramite quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Nello specifico, si è scelto di misurare i livelli di espressione del miR-210 a partire da RNA totale o da tessuto intero ottenuto da campioni di Drosophila melanogaster. Il miR-210 è un miRNA altamente conservato che, in Drosophila, è stato visto essere coinvolto nel mantenimento dell’omeostasi retinica. Per studiare la sua funzione sono state generate delle linee over-esprimenti il miR-210, il cui livello di espressione è stato poi quantificato attraverso le tecniche precedentemente citate. In generale, la quantificazione del miR-210 con la tecnica basata sulla chemiluminescenza, a partire da campioni di RNA totale, ha restituito risultati soddisfacenti e confrontabili con quelli ottenuti con la qRT-PCR; al contrario, partendo da tessuto intero, i risultati non sono stati ottimali, motivo per cui la tecnica dovrà essere ulteriormente perfezionata.