Editing genico mediante CRISPR-Cas nel muscolo scheletrico

CRISPR – Cas è una tecnologia di genome editing tra le più innovative presenti nell’ambito della ricerca scientifica. Le sue applicazioni sono molteplici e spaziano in diversi ambiti di interesse biotecnologico. CRISPR – Cas è stata una scoperta rivoluzionaria perché applica un meccanismo scoperto nei batteri, come mezzo di difesa contro infezioni virali, per modificare il DNA di un organismo d’interesse. Il complesso CRISPR – Cas prevede l’associazione di un’endonucleasi (Cas) ad una guida a RNA (gRNA) per generare un taglio in doppio filamento sul DNA endogeno, la cui risoluzione mediante meccanismi di riparo del DNA porta alla modifica dello stesso. Tale metodologia è stata usata presso il laboratorio di E. Holson della UT Southwestern per generare un modello di topo knock out per il gene Dmd, denominato ΔEx51 dal momento che ne viene eliminato l’esone 51. Si ricreano quindi le condizioni genetiche di un soggetto affetto da Distrofia Muscolare di Duchenne (DMD). In questo modo è stato possibile analizzare i pathway molecolari di degenerazione e rigenerazione del muscolo scheletrico, caratteristici della DMD, e ricavare informazioni non solo sui marker genetici di interesse nella patologia, ma anche come la loro trascrizione viene alterata nel modello ΔEx51 rispetto ad un wild type.