Liposomi super stealth diretti verso il recettore HER-2 e caricati con doxorubicina per la terapia del carcinoma ovarico

Il carcinoma ovarico è la settima più comune tipologia di neoplasia maligna nelle donne e l’ottava causa di morte cancro-correlata nel mondo. Questa patologia si presenta con non-specifici dolori addominali e pelvici, e la prognosi è solitamente determinata dallo stadio e dal grado della neoplasia. Tra le varie tipologie di carcinoma all’ovaio, quello di tipo “epiteliale” risulta essere il più comune, il 70% dei casi viene diagnosticato allo stadio III o IV, ed è associato ad una prognosi infausta. In diverse forme tumorali si osserva una sovra espressione del recettore del fattore di crescita epidermico umano HER2 e la somministrazione di farmaci mirata ad HER2 nella terapia per il carcinoma ovarico ha portato beneficio ad alcune pazienti, anche se la sua efficacia deve ancora essere confermata in popolazioni più ampie. Lo scopo di questa tesi è stato quello di valutare in vivo un innovativo sistema di drug delivery super stealth liposomiale denominato SSIL4, caricato con doxorubicina e diretto verso il recettore HER2 mediante l’anticorpo monoclonale Trastuzumab, per il rilascio sito-specifico dell’antraciclina. Come controllo è stata utilizzata la formulazione denominata SSL4, priva dell’anticorpo anti HER-2. Le formulazioni sono state testate in topi SCID femmina inoculate con la linea cellulare di tumore ovarico SKOV-3, che iperesprime il recettore HER-2. Pur essendo entrambi caratterizzati da una buona capacità di ridurre la massa tumorale, i liposomi SSIL4 hanno evidenziano una sopravvivenza maggiore rispetto agli animali di controllo e agli animali trattati con la formulazione SSL4. Al termine del protocollo di trattamento (quattro iniezioni ogni cinque giorni alla dose di 5 mg/kg), gli animali sono stati sacrificati, il tumore è stato espiantato e sono state eseguite analisi istologiche mediante la colorazione ematossilina ed eosina ed è stata valutata l’espressione di HER-2 nei lisati tumorali. Quest’ultima ha evidenziato una riduzione dell’espressione di HER-2 nei topi con la formulazione SSIL4. Nella seconda parte del progetto di tesi, è stata valutata l’efficacia in vitro di altre formulazioni immunoliposomiali denominate SIL 2/5 (coniugate all’anticorpo Trastuzumab) e SL 2/5 (non coniugata), caricate entrambe all’interno con il citotossico Doxorubicina. L’effetto delle formulazioni in vitro è stato valutato mediante un saggio di vitalità cellulare basato sulla misura indiretta dell’ATP nella linea cellulare SKOV-3 dopo 24 ore di trattamento seguite da 72 ore di washout, e tramite il saggio di immunocitochimica è stata valutata l’internalizzazione di entrambe le formulazioni dopo 24 ore di trattamento e dopo 24 ore di trattamento seguite da 72 ore di washout. La formulazione SSIL4 testata, oltre ad un aumento dell’internalizzazione dei liposomi, ha dimostrato una promettente attività antitumorale in vitro.