Valutazione dei parametri fisiologici e dello stato ossidativo del seme di giovani tori PRI in relazione alle variabili ambientali

L’obiettivo di questa tesi prevede lo studio delle caratteristiche del seme di tori Pezzata Rossa (n=120) e delle variazioni ambientali definite dal THI “Indice di Temperatura-Umidità”. Sono stati analizzati i parametri qualitativi del seme e gli indicatori di status ossidativo del plasma seminale in laboratorio. Gli animali sono stati allevati presso il centro genetico ANAPRI (Associazione Nazionale Allevatori Pezzata Rossa Italiana) con sede a Fiume Veneto (PN). Il seme è stato raccolto con vagina artificiale da 120 giovani tori di età compresa tra 363 e 419 giorni, tra febbraio 2022 e settembre 2023. Dopo la raccolta sono stati valutati i principali parametri di qualità seminale: il volume, la concentrazione, la morfologia e la motilità, tenendo in particolare conto di tali misurazioni: motilità totale (total motilty, TM, %), motilità progressiva (progressive motility, PM, %), velocità curvilinea (curvilinear motility, VCL, µm/s), velocità media (average path velocity, VAP, µm/s), velocità rettilinea (straight-line velocity, VSL, µm/s), rettilineità (straightness, STR, %), linearità (linearity, LIN, %), spostamento laterale della testa medio (average lateral head displacement, ALH, µm), spostamento laterale della testa massimo (maximum lateral head displacement, mALH, µm), frequenza (beat cross frequency, BCF, Hz) e oscillazione (wobble, WOB, %). Per la valutazione dello status ossidativo sono state svolte analisi sul plasma seminale in merito alla concentrazione di Advanced Oxidation Protein Products (AOPP), gruppi carbonili (CT) e tioli. Per l’analisi statistica sono state valutate le relazioni tra i diversi parametri fisiologici degli spermatozoi e del plasma seminale tramite modelli di regressione lineare, considerando come relazioni significative quelle aventi p < 0.05. Dai risultati si osserva che vi è una relazione positiva tra la concentrazione di AOPP (nmol/mL) del PS e la concentrazione di spermatozoi nell’eiaculato, la TM e la PM. Inoltre è stato osservato all’aumentare della concentrazione di testosterone (TST) nel PS risulta un aumento significativo della percentuale di anomalie spermatiche minori e una riduzione della percentuale di spermatozoi normali e gli spermatozoi normali vivi. I parametri seminali sono stati posti in relazione con il THI ambientale delle 24h e dei 60 giorni precedenti al prelievo tramite l’utilizzo di modelli di regressione lineare. È stato osservato che all’aumentare del THI dei 60 giorni precedenti al prelievo, si ha un aumento delle anomalie maggiori e delle anomalie minori. Inoltre, è stata osservata una relazione significativa tra l’aumento del THI dei 60 gg precedenti al prelievo e la TM, PM, LIN e la concentrazione di AOPP nel PS. Sia il THI dei 60 gg sia il THI delle 24h presentano relazioni positive con i parametri di motilità seminale e la concentrazione di AOPP nel PS, ma per quanto riguarda il THI dei 60 gg si nota una maggior influenza sulle anomalie maggiori e minori. Infine, sono state eseguite le analisi Western Blot sul plasma seminale di alcuni campioni, selezionati in base al diverso contenuto di AOPP nel plasma seminale, per valutare le concentrazioni di di-tirosina (DT), considerando le numerose relazioni delle AOPP con i diversi parametri seminali e ambientali. È stato osservato che la DT è maggiormente espressa a specifici pesi molecolari (11 kDa, 14,5 kDa, 36 kDa); l’intensità di fluorescenza della DT a questi pesi molecolari è stata messa in relazione con le AOPP, osservando una relazione tra AOPP e DT quando la concentrazione di AOPP è maggiore di 100 nmol/mL. Lo stress ossidativo correla quindi con lo stress da calore, ma con l’aumento del THI si osservano un aumento della TM e della PM degli spermatozoi. Le AOPP sono rilevanti da approfondire, soprattutto in relazione allo studio della DT.