IMMUNOREACT 18: Familial Predisposition to Colorectal Cancer Affects the Immune Landscape in Rectal Cancer Patients – A Cohort Study.

Background: Despite growing interest in the tumor immune microenvironment (TME) in colorectal cancer (CRC), few studies have specifically examined rectal cancer in the context of familial predisposition, especially in patients with Familial Colorectal Cancer Type X (FCCTX). Aim of the study: This study aimed to characterize the immune profile of histologically normal rectal mucosa in patients with FCCTX, with the goal of identifying immunological features that may distinguish them from sporadic rectal cancer cases. Materials and Methods: Patients with rectal cancer from two cohorts, IMMUNOREACT1 (nRCT-naïve) and IMMUNOREACT2 (post-nRCT), were included in the study (ClinicalTrials.gov: NCT04915326, NCT04917263). Patients were classified as FCCTX (familial history) or Sporadic (no familial history). Immune profiling of histologically normal rectal mucosa was performed using immunohistochemistry and flow cytometry to compare T cell subsets and antigen presentation markers between the groups. Results: In the IMMUNOREACT1 cohort (n = 84), 25 patients (30%) were classified as FCCTX. Compared to sporadic cases, FCCTX patients showed significantly higher CD4⁺ T cell density (p = 0.012). Moreover, FCCTX tended to have lower T-bet expression (p = 0.075), while significantly lower values of the proportion between Tbet+/CD3+ cells (p = 0.027) and Tbet+/CD8+ cells (p = 0.008) were found in this patients. PD-L1 expression on tumor-infiltrating lymphocytes trended higher in FCCTX (p = 0.09). In contrast, sporadic patients had significantly more FoxP3⁺ T cells among CD3+ cells (p = 0.008) and a higher FoxP3+/CD8+ ratio (p = 0.006), suggesting a more immunosuppressive microenvironment. In the IMMUNOREACT2 cohort (n = 104), 25 patients (24%) were FCCTX. This group exhibited elevated CD8⁺CD38⁺ T cells (p = 0.06), a higher CD8⁺CD28⁺ cell rate (p = 0.01) and lower epithelial HLA-ABC expression (p = 0.05). Moreover, FCCTX presented a significant higher number of CD8+cells (p = 0.004) and a significantly increased number of Tbet+cells (p = 0.019). FCCTX cases also showed significantly more advanced tumor stages (p = 0.02). All tumors were microsatellite-stable by IHC. Conclusions: The present study highlights the existence of a distinct immune mucosal environment in patients with FCCTX, both at baseline and following n-RCT. The mucosal immune profile in FCCTX appears to differ from that of sporadic cases, suggesting that familial genetic background may influence the local immune architecture. Further investigation is warranted to elucidate the functional implications of this immune phenotype and its potential role in disease prognosis, surveillance, and therapeutic stratification in hereditary CRC.

Presupposti dello studio: Nonostante il crescente interesse per il microambiente immunitario tumorale (TME) nel cancro del colon-retto (CRC), pochi studi hanno esaminato specificamente il cancro del retto nel contesto della predisposizione familiare, in particolare nei pazienti affetti da cancro del colon-retto familiare di tipo X (FCCTX). Obiettivo dello studio: Questo studio mira a caratterizzare il profilo immunitario della mucosa rettale istologicamente normale in pazienti affetti da FCCTX, con l'obiettivo di identificare le caratteristiche immunologiche che potrebbero distinguerli dai casi sporadici di cancro del retto. Materiali e Metodi: Sono stati inclusi nello studio pazienti affetti da cancro del retto provenienti da due coorti, IMMUNOREACT1 (nRCT-naïve) e IMMUNOREACT2 (post-nRCT) (ClinicalTrials.gov: NCT04915326, NCT04917263). I pazienti sono stati classificati come FCCTX (storia familiare) o sporadici (nessuna storia familiare). È stato eseguito il profilo immunitario della mucosa rettale istologicamente normale utilizzando l'immunoistochimica e la citometria a flusso per confrontare i sottogruppi di cellule T e i marcatori di presentazione dell'antigene tra i gruppi. Risultati: Nella coorte IMMUNOREACT1 (n = 84), 25 pazienti (30%) sono stati classificati come FCCTX. Rispetto ai casi sporadici, i pazienti FCCTX hanno mostrato una densità di cellule T CD4⁺ significativamente più elevata (p = 0,012). Inoltre, i pazienti FCCTX tendevano ad avere un'espressione di T-bet più bassa (p = 0,075) e in questi pazienti sono stati riscontrati valori significativamente più bassi della proporzione tra cellule Tbet+/CD3+ (p = 0,027) e cellule Tbet+/CD8+ (p = 0,008). L'espressione di PD-L1 sui linfociti infiltranti il tumore era tendenzialmente più elevata nei pazienti FCCTX (p = 0,09). Al contrario, i pazienti sporadici presentavano un numero significativamente maggiore di cellule T FoxP3⁺ tra le cellule CD3+ (p = 0,008) e un rapporto FoxP3+/CD8+ più elevato (p = 0,006), suggerendo un microambiente più immunosoppressivo. Nella coorte IMMUNOREACT2 (n = 104), 25 pazienti (24%) erano FCCTX. Questo gruppo presentava un aumento dei linfociti T CD8⁺CD38⁺ (p = 0,06), un tasso più elevato di cellule CD8⁺CD28⁺ (p = 0,01) e una minore espressione epiteliale di HLA-ABC (p = 0,05). Inoltre, FCCTX presentava un numero significativamente più elevato di cellule CD8+ (p = 0,004) e un numero significativamente maggiore di cellule Tbet+ (p = 0,019). I casi FCCTX mostravano anche stadi tumorali significativamente più avanzati (p = 0,02). Tutti i tumori erano microsatellite-stabili secondo l'IHC. Conclusioni: Il presente studio evidenzia l'esistenza di un ambiente immunitario mucosale distinto nei pazienti affetti da FCCTX, sia costitutivo nei pazienti naive che dopo n-RCT. Il profilo immunitario mucosale nei pazienti FCCTX sembra differire da quello dei casi sporadici, suggerendo che il background genetico familiare possa influenzare l'architettura immunitaria locale. Sono necessarie ulteriori indagini per chiarire le implicazioni funzionali di questo fenotipo immunitario e il suo potenziale ruolo nella prognosi della malattia, nella sorveglianza e nella stratificazione terapeutica nel CRC ereditario.