I peptidi bioattivi e la loro funzione antinfiammatoria nella via di segnalazione di NF-kB

L’obiettivo di questo lavoro di tesi è quello di analizzare , più da vicino , peptidi bioattivi di matrice alimentare , frammenti proteici di lunghezza compresa tra i 2 e i 20 amminoacidi , coinvolti nella risposta infiammatoria . Lo stress infiammatorio è associato a numerose malattie acute e croniche , motivo per cui lo studio delle vie di segnalazione che lo determinano è diventato di vitale importanza per lo sviluppo di nuove tecniche atte a contrastarlo . I peptidi ana l izzati in questo studio sono K-8-K e S-10-S , ottenuti a partire d a un processo di fermentazione operat o , in ordine , sul latte e sulla soia . E ntrambi sono il risultato di numerosi studi pregressi svolti sul la via di segnalazione Keap1 - Nrf2 -ARE fondamentale per proteggere le cellule dallo stress ossidativo determinato dai ROS . L ’attivazione di Nrf2 influenza consistentemente la via di segnalazione di NF- kB , un fattore di trascrizione che dà il segnale d ’inizio per la trascrizione di geni pro-infiammatori . I n virtù del legame tra l e due vi e di segnalazione questo studio vuole comprendere s e i peptidi selezionati possono esercit are oltre all’attivit à antiossidante , già studiata , anche un’attività antinfiammatoria . È stata perciò condotta una prima analisi sui livelli di HO-1 nelle cellule Caco-2 trattate con K-8-K e S-10- S , dato che tale proteina svolge un ruolo chiave nell ’inibizione della via soggetta a stud io e i suoi livelli ci permettono di determinare l’attivazione della via Keap1-Nrf2 . Visti i risultati ottenuti le cellule Caco-2 sono state sottoposte a stress infiammatorio ad opera d el fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-α) in modo tale da analizzare l e variazioni nella traslocazione nucleare di NF- kB . Dopodiché è stat a valutat a l’espressione , all’interno della stessa linea cellulare , delle citochine pro -infiammatorie e antinfiammatorie. Ed infine per avere una conferma della diminuzione dell’attività di NF- kB le cellule Caco-2 vengono esposte a d un ulteriore stress infiammatorio questa volta dovuto all’LPS , confermando i risultati ottenuti con il TNF-α. In conclusione, i dati ottenuti hanno permesso di confermare l’ipotesi iniziale che K-8-K e S-10-S hanno un effetto antinfiammatorio impedendo la traslocazione dal citosol al nucleo di NF- kB e quindi di conseguenza di impedire la trascrizione di geni pro-infiammatori.