Multitargeted biological action of polydatin in Calcium Pyrophosphate Crystals-induced arthritis

Objective: Polydatin (PD) is a stilbenoid with significant antioxidant, anti-inflammatory, and immunomodulatory properties. The aim of this study was to evaluate the anti-inflammatory properties of PD using an in vitro model of inflammation induced by synovial fluids (SF) obtained from patients affected by calcium pyrophosphate (CPP) crystal-induced arthritis. Materials and Methods: Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), isolated from healthy donors using Ficoll, were pretreated with PD (200 µM) and subsequently stimulated with 10% SF. A chemotaxis assay was performed to evaluate the effect of PD on PBMCs migration in response to the conditioned medium and to examine the migration of cells stimulated with SF and treated with PD. A binding assay was also carried out to test the interaction between VEGF and PD. Chemokine, cytokine, and growth factor levels were quantified using ELISA. Results: PD reduced the levels of VEGF, pro-inflammatory cytokines, and chemokines in PBMCs stimulated with SF. The conditioned medium derived from PBMCs treated with SF induced greater cell migration compared to that obtained from untreated PBMCs. Moreover, the conditioned medium obtained from PBMCs cultures treated with SF + PD induced a lower chemotactic response compared to that obtained from PBMCs treated with SF alone. Cells treated with SF showed greater migratory capacity compared to untreated ones, while pretreatment with PD attenuated this migration. The binding assay revealed a possible interaction between VEGF and PD. Conclusion: These results suggest that the anti-inflammatory effects of PD are mainly mediated by mechanisms regulating leukocyte migration and the suppression of pro-inflammatory mediators.

Obiettivo: La polidatina (PD) è uno stilbenoide con significative proprietà antiossidanti, antinfiammatorie e immunomodulanti. L’obiettivo di questo studio è stato quello di valutare le proprietà antinfiammatorie della PD, utilizzando un modello in vitro di infiammazione indotta da liquidi sinoviali (LS) ottenuti da pazienti affetti da artrite indotta da cristalli di pirofosfato di calcio (CPP). Materiali e metodi: Le cellule mononucleate da sangue periferico (PBMC), isolate da donatori sani tramite Ficoll, sono state pretrattate con PD (200 µM) e successivamente stimolate con il 10% di LS. È stato effettuato un saggio di chemiotassi per valutare l’effetto della PD sulla migrazione dei PBMC in risposta al terreno condizionato e per esaminare la migrazione delle cellule stimolate con LS e trattate con PD. È stato inoltre eseguito un saggio di binding per testare l’interazione tra VEGF e PD. I livelli di chemochine, citochine e fattori di crescita sono stati quantificati tramite ELISA. Risultati: La PD ha ridotto i livelli di VEGF, citochine e chemochine pro-infiammatorie nei PBMC stimolati con LS. Il terreno condizionato derivato da PBMC trattati con i LS, ha indotto una maggiore migrazione cellulare rispetto a quello ottenuto da PBMC non trattati. Inoltre, il terreno condizionato ottenuto da colture di PBMC trattati con LS + PD ha indotto una risposta chemiotattica inferiore rispetto a quello ottenuto da PBMC trattati con solo LS. Le cellule trattate con LS hanno mostrato una maggior capacità migratoria rispetto a quelle non trattate, mentre il pretrattamento con PD ha attenuato tale migrazione. Il saggio di binding ha evidenziato una possibile interazione tra VEGF e PD. Conclusione: Questi risultati suggeriscono che gli effetti antinfiammatori della PD sono mediati principalmente da meccanismi che regolano la migrazione leucocitaria e la soppressione di mediatori pro-infiammatori.