Sintesi di coniugati dimerici di acidi biliari legati da linker glicinici e legati a NBD come potenziali inibitori dell’infezione da HBV

HBV is nowadays the main cause of hepatocellular carcinoma and it is estimated that its infection is responsible for the death of 290 million people every year. The infection consists of a selective process that affects only hepatocytes: the target and entrance of the virus in the cell is the bile acid transporter NTCP, that is expressed by hepatocytes and is responsible for the uptake of bile acids from the bloodstream. Studies showed that a possible inhibition mechanism for the entrance of the virus could be the use of bile acids and of bile acid conjugates. Bile acid conjugates are molecules obtained by the conjugation of two or more bile acid moieties. Both conjugated and free bile acids are competitive antagonists for the same active site on the membrane protein exploited by preS1 viral domain during the infection, but conjugated forms show increased inhibiting activity. To further increase the affinity, and consequently the efficacy, of bile acids conjugates, the structure-activity relationship (SAR) of these compounds has been considered. In conclusion, the aim of this work was to develop a synthesis process for target products that include most of the SAR key features, in order to obtain a possible HBV infection inhibitor lead. The compounds are conjugated with a fluorophore molecule, NBD, to allow in vitro and in vivo studies.

Il virus dell’HBV è ad oggi la causa principale del carcinoma epatocellulare e si stima che l’infezione sia responsabile della morte di 290 milioni di persone ogni anno. L’infezione consiste in un processo selettivo che coinvolge solo gli epatociti: il target del virus, e punto di entrata nella cellula, è il trasportatore di acidi biliari NTCP, che è espresso dagli epatociti ed è responsabile dell’internalizzazione di acidi biliari dal torrente sanguigno. Studi precedenti hanno dimostrato che un possibile meccanismo di inibizione per l’entrata del virus potrebbe essere l’uso degli acidi biliari e di coniugati di acidi biliari. I coniugati di acidi biliari sono molecole ottenute dalla coniugazione di due o più strutture degli stessi. Acidi biliari liberi e coniugati sono antagonisti competitivi per lo stesso sito attivo che viene riconosciuto e sfruttato dal dominio virale preS1 durante il processo infettivo. In particolar modo, i coniugati hanno mostrato maggiore attività inibitoria e per aumentarne ulteriormente l’affinità, e di conseguenza l’efficacia, sono state considerate le loro relazioni struttura-attività (SAR). Lo scopo di questo lavoro è, quindi, quello di sviluppare un processo di sintesi per quattro prodotti target che includono la maggior parte delle caratteristiche chiave per il riconoscimento del trasportatore e per l’inibizione dell’entrata del virus, in modo tale da ottenere un possibile lead per un futuro farmaco capace di inibire il processo infettivo. I prodotti sono coniugati ad un fluoroforo, NBD, per permettere studi in vitro e in vivo.